荧光寿命光谱仪是一种定性、定量分析的仪器,专门为超快荧光寿命的测量而设计,是全自动的操作提供灵活和用户友好的光子计数荧光寿命系统。通过荧光光谱仪的检测,可以获得物质的激发光谱、发射光谱、量子产率、荧光强度、荧光寿命、斯托克斯位移、荧光偏振与去偏振特性,以及荧光的淬灭方面的信息。
在设计过程中,荧光寿命光谱仪着重解决了传统光路的构架对待测超快信号的脉冲展宽效应,从而大幅度提高了荧光寿命测量的精度。 它主要包括光源、激发单色器、样品池、荧光单色器及检测器等主要部件:
1、光源
早期的荧光分光光度计,配有能发生很窄汞线的低压汞灯。使用高压汞灯,谱线被加宽,而且也存在高强度的连续带。然而,一个完整的激发光谱的测定需一种能发射从可见到紫外范围的较高强度的光辐射的灯。氙弧灯能适于此条件,因此,它是目前在荧光分光光度计中广泛使用的光源。
2、单色器
单色器的作用是把光源发出的连续光谱分解成单色光,并能准确方便地“取出”所需要的某一波长的光,它是光谱仪的心脏部分。单色器主要由狭缝、色散元件和透镜系统组成,其中色散元件是关键部件。色散元件是棱镜和反射光栅或两者的组合,它能将连续光谱色散成为单色光。
3、样品池
荧光仪用的样品池需用低荧光的材料制成,通常用玻璃和石英材料,形状以方形和长方形为宜。
4、检测器
主要有硒光电池、光电管和光电倍增管等。目前来说由于荧光的强度较弱,一般以光电倍增管作检测器。选择光电倍增管要考虑响应波长、灵敏度和噪声水平等。蓝敏管对蛋白质、核酸的测量适用,而红敏管则适用于荧光染料检测。